液相色谱柱的挑选与洁净申明
点击次数：1516 更新时候：2020-05-12
液相色谱柱的液相色谱(HPLC)手艺是20世纪60年月前期成长起来的一种分手阐发手艺，是古代分手和测定的主要手腕。自问世以来，它以其分手效力高、阐发速率快、检测活络度高、沸点高但不能汽化热不不变的心理活性物资等长处，在生归天学、医学和临床阐发等范畴获得了普遍的利用。液相色谱柱作为一种耗损品，跟着利用时候的耽误或打针次数的增添，色谱峰高减小，峰宽增大或肩峰呈现，柱效应减小。须要按期停止*的洗濯和再生，并且差别的柱洗濯体例也差别。如C8柱、C18柱的洗濯：
液相色谱仪常常利用的C8柱、C18柱。当活动相仅为乙腈-水或甲醇-水时，流速1.0ml/min冲刷30min，，柱温坚持尝试时的温度。
水相中有无机盐、外表活性剂或三乙胺、高氯酸等物资时，先接纳纯水(或含有2%甲醇)，冲刷A管路(尝试中接纳的管路)，时候30min(如活动相中有外表活性剂，则恰当增添时候)，流速1.0ml/min，柱温可较尝试温度超出跨越5~10℃。随后改换成20%甲醇再冲刷30min，流速不变，柱温箱加热装配封闭。竣事后取下色谱柱安排阴凉处。
理论证实没须要接纳高比例的甲醇冲刷，由于剩余无机相中的水相遇到高比例甲醇后在泵头上、色谱柱中会析出少许盐和外表活性剂，致使色谱柱寿命延长。
对液相色谱柱的挑选要注重：
1.PH值利用规模
硅胶为基质填料，利用时必然要注重活动相的PH规模。普通的C18柱PH值规模都在2-8，活动相的PH值小于2时，会致使键合相的水解；当PH值大于7时硅胶易溶解；常常利用缓冲液牢固相要降解。一旦产生上述环境，色谱柱进口处会陷落。一样填料各类差别商标的色谱柱不尽不异。若是活动相PH较高或常常利用缓冲液时，倡议挑选PH规模大的柱子。
2.填料的端基封尾
把填料的剩余硅羟基接纳封口手艺停止端基封尾，可改良对极性化合物的吸附或拖尾；含碳量增高了，有益于不易保留化合物的分手；填料不变性好了，组分的保留时候重现性就好。若是待阐发的样品属酸性或碱性的化合物，选用填料经端基封尾的色谱柱。
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